A potential hybrid nanocomposite of poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) and fullerene for bone tissue regeneration and sustained drug release against bone infections.

Developing a multifunctional biomaterial for bone filling and local antibiotic therapy is a complex challenge for bone tissue engineering. Hybrid nanocomposites of poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) (PHBHV) with nanohydroxyapatite (nHA), fullerene (C60), and vancomycin (VC) were produced by injection. Fullerene was successfully impregnated with VC, as seen in FTIR. The crystallinity degree of PHBHV was slightly reduced in the presence of C60 and VC (64.3 versus 60.8 %), due to the plasticizing effect of these particles. It also resulted in a decrease in the glass transition temperature (Tg), observed by differential scanning calorimetry (DSC). Dense PHBHV/nHA/C60/VC had a flexural elastic modulus 29 % higher than PHBHV, as a result of the good interface between PHBHV, C60, and nHA - particles of high elastic modulus. Dense disks released 25.03 ± 4.27 % of VC for 14 days, which demonstrated its potential to be an alternative treatment to bone infections. Porous scaffolds of PHBHV/nHA/C60/VC were 3D printed with a porosity of 50 % and porous size of 467 ± 70 µm, and had compression elastic modulus of 0.022 GPa, being a promising material to trabecular bone replacement. The plasticizing effect of C60 improved the printability of the material. The hybrid nanocomposite was non-cytotoxic and showed good ability in adhering macrophage cells.

Formulation and characterization of a novel PHBV nanocomposite for bone defect filling and infection treatment.

Biodegradable materials that combine bioactivity with sustained drug release have been proved promising for the treatment and prophylaxis of bone infection. In this work, injection-molded nanocomposites were formulated from poly(3-hydroxybutyrate-co-3-6%hydroxyvalerate) (PHBV), nanodiamond (nD) and nanohydroxyapatite (nHA) loaded with vancomycin (VC). The components were compounded using a rotary evaporator (PHBV/nHA/VC/nD-R) or a spray-dryer (PHBV/nHA/VC/nD-SD). The nanoparticles acted as a nucleating agent, increasing PHBV crystallinity from 57.1% to up to 73.3% (PHBV/nHA/VC/nD-SD). The nHA particles were found to be well distributed on the formulations fracture surface observed by SEM-EDS micrographs. PHBV/nHA/VC/nD-SD presented higher glass transition temperature (18.1 vs 14.8 °C) and stronger interface than PHBV/nHA/VC/nD-R, as determined by dynamic mechanical analysis (DMA). Furthermore, the incorporation of nanoparticles increased PHBV flexural elastic modulus by 34% and match the reported for human bone. Both systems were able to present a sustained release of VC for 22 days, reaching 7.1 ±â€¯1.3%(PHBV/nHA/VC/nD-R) and 4.8 ±â€¯0.6% (PHBV/nHA/VC/nD-SD). VC presented antibacterial activity even after being processed at 178 °C in an injection molding machine. Moreover, in vitro assays showed a good adhesion and growth of cells on the specimens and suggested a non-cytotoxic and non-cytostatic behavior. These findings indicate that these systems can be further explored as bone defect filling material.

Leptospira and Brucella antibodies in collared anteaters (Tamandua tetradactyla) in Brazilian zoos.

The presence of Leptospira spp. and Brucella spp. antibodies was investigated in serum samples from 28 collared anteaters (Tamandua tetradactyla) kept in seven Brazilian zoos. Sera were tested against 19 Leptospira serovars using microscopic agglutination. Samples reacted to the following serovars: two (7.14%) to Patoc, three (10.71%) to Tarrasovi, three (10.71%) to both Patoc and Tarrasovi, two (7.14%) to Wolffi, and one (3.57%) to Australis. Two (7.14%) samples reacted to the buffered Brucella antigen test, but no confirmatory reaction occurred using the 2-mercaptoethanol slow slide agglutination test. No sample was reactive in the agar gel immunodiffusion test for rugose species of Brucella. The presence of anti-leptospira agglutinins in captive T. tetradactyla serum indicates that this species may be susceptible to infection by these bacteria.

Avaliação microbiológica de hortaliças provenientes de hortas comunitárias de Campos dos Goytacazes, RJ / Microbiological evaluation of communitarian vegetables proceeding from Campos dos Goytacazes, RJ

O objetivo deste estudo foi investigar a qualidade microbiológica de hortaliças provenientes de diferentes hortas comunitárias da cidade de Campos, Rio de Janeiro, bem como a qualidade da água utilizada na irrigação das mesmas. Além disso, a sensibilidade das cepas de Escherichia coli isoladas das hortaliças a antimicrobianos foi determinada. De acordo com os resultados encontrados, 100 por cento das amostras de hortaliças analisadas estavam contaminadas por coliformes totais, 90 por cento por coliformes fecais e 43,3 por cento foram positivas para E. coli. A incidência de E. coli nas hortaliças foi cerca de mais de 30 por cento superior a da água, indicando que além da contaminação pela água, podem ter existido outras fontes de contaminação das hortaliças. Mais de 80 por cento das cepas de E. coli isoladas das hortaliças, foram sensíveis a tobramicina, cloranfenicol, netilmicina, gentamicina, sulfazotrim, enquanto 61,2 por cento e 50 por cento foram resistentes a cefalotina e à ampicilina, respectivamente.

Avaliação físico-química, microbiológica e de resíduos de penicilina, em leite tipo ôCö comercializado no município de Campos dos Goytacazes, RJ / Physicochemical evaluation, microbiological and of residues of penicillin, in milk kind ôCö traded in Campos dos Goytacazes, RJ

O presente trabalho verificou a ocorrência de resíduos de antibióticos no leite pasteurizado tipo öCö , vendido na cidade de Campos dos Goytacazes, Estado do Rio de Janeiro. Além disso, as características físico-químicas e microbiológicas deste produto foram avaliadas. Durante o período de três meses, 43 amostras foram analisadas e foi encontrada a presença de penicilina G em níveis superiores a 4mg/Kg em 16 amostras (37,21 por cento). As análises microbiológicas revelaram que 25,58 por cento das amostras que foram analisadas não estavam dentro das especificações legais para coliformes totais e fecais.

Relação do teste de Alizarol a 72 por cento (v/v) em leite "in natura" de vaca com acidez e contagem de células somáticas: análise microbiológica / Relation between test of the Alizarol 72 per cent in nature milk with acidity and somatic cells counts

Foram analisados a estabilidade ao Alizarol 72 por cento, pH, graus Dornic (ºD), prova da fervura, contagem de células somáticas e isolamento bacteriano no leite "in natura" em 847 quartos de 37 animais de uma propriedade em Campos dos Goyacazes, RJ. Observou-se que as amostras de leite positivas no teste do Alizarol não tiveram acidez detectáveis pelo pH e titulação em graus Dornic, e possuíam resistência térmica. Não ocorre o envolvimento de bactérias, como causa da instabilidade do leite examinado.

Detection of different Staphylococcus aureus strains in bovine milk from subclinical mastitis using PCR and routine techniques

Contamination of fresh milk with Staphylococcus aureus was assessed comparatively through routine phenotypic (coagulase tube test and coagulase slide test) and genotypic (PCR) screening of 128 S. aureus strains isolated from 555 milk samples. These samples were collected from 362 cows with subclinical mastitis, hosted in different dairy herds at various locations of the Northern and Northeastern rural areas of the State of Rio de Janeiro, 39.7 per cente of which were CMT-positive. All S. aureus isolates tested positive for the presence of the coagulase gene by PCR and the isolates could be grouped into four distinct classes according to the size of the PCR product. The strains also yielded variable results when assayed with coagulase test. Taken together, these data indicate the existence of extensive polymorphism at the coagulase gene locus in the genus Staphylococcus and exemplifies the extent of molecular and phenotypic heterogeneity associated with the strains circulating in rural herds.(au)

Determinação de resíduos de antibioticos, utilizando-se métodos de inibição microbiana, enzimatico e imuno-ensaios no leite pasteurizado comercializado na Região Norte do estado do Rio de Janeiro, Brasil / Antibiotics residues determination, using microbial inhibition, protein-binding and immunoassays methods, in pasteurized milk commercialized in the Northern region of Rio de Janeiro State, Brazil

O leite contaminado por resíduos de antimicrobianos é considerado adulterado e impróprio para o consumo, representando riscos à saúde do consumidor, riscos tecnológicos para a indústria de laticínios e rejeição da imagem da empresa pelo consumidor. Com os objetivos de determinar a freqüência da contaminação por resíduos de antimicrobianos no leite pasteurizado dos tipos "C" e "Integral Fazenda" comercializado na região Norte do Estado do Rio de Janeiro foram analisadas 300 amostras de leite pasteurizado tipo "C" (130 amostras) e "Integral Fazenda" (170 amostras) oriundas dessa região, de abril de 1996 a abril de 1997. Foi encontrada uma freqüência de 4.33 por cento de contaminação por resíduos de inibidores microbianos no leite, utilizando-se, paralelamente, o método de inibição microbiana "Delvotest P" e o de proteínas ligadoras de penicilinas "bL Snap Test". A utilização isolada do "Delvotest P" revelou uma ocorrência de 3,66 por cento e do "bL Snap Test" uma freqüência de 1,66 por cento. Para as amostras "Delvotest P" positiva e "bL Snap Test" negativa, foram utilizados testes para detectar tetraciclinas ("Tetraciclina Snap Test") e gentamicina ("Cite Probe Gentamicin"). Conclui-se que houve contaminação no leite de consumo, por vários tipos de antimicrobianos, na Região Norte do Estado do Rio de Janeiro.

Milk contamination by antimicrobial residues occurs by profilactic or therapeutic use of such agents in the treatment of mastitis and other diseases in lactating cows, through supplementary diets in catttle feeding and from fradulent use in milk preservation. Milk contaminated by antimicrobial residues is considered adulterated and inappropriate for human consumption, since it represents a health risk for consumers, a threat to the dairy industry and causes a negative image for the contaminated products. Milk contamination is also recognized as a critical indicator of infection and a lack of microbiological quality and the possible presence of pathogenic microorganisms in milk. The objective of this research was to determine the frequency of contamination with antimicrobial residues in pasteurized type "C" and "Integral" milk commercialized in the northern region of Rio de Janeiro State, Brazil.. 300 samples of pasteurized type "C" milk (130 samples) and "Integral" milk (170 samples) from the northern region of Rio de Janeiro State were analysed using two rapid tests between April 1996 and April 1997. A contamination frequency of 4.33 percent with antimicrobial residues in milk was found utilizing parallel methods of microbial inhibition (Delvotest P) and protein-binding (bL Snap Test). The separate utilization of the Delvotest P revealed a frequency of 3,66 percent and bL Snap Test of 1,66 percent. It was concluded that the milk in the northern region of Rio de Janeiro State was contaminated.

Staphylococcus aureus sensíveis à meticilina provenientes de leite mastítico no Estado do Rio de Janeiro / Methicillin susceptible Staphylococcus aureus from mastitic milk in Rio de Janeiro State, Brazil

Em um total de 364 vacas portadoras de mastite subclínica e 1398 quartos mamários examinados, 555 amostras de leite foram coletadas durante os anos de 1996 e 1997 de 64 propriedades, em 15 municípios da regiäo Norte/Noroeste do Estado do Rio de Janeiro. As amostras de leite foram testadas a partir de CMT (California Mastitis Test) e 128 cepas de Staphylococcus aureus foram isoladas e identificadas após análise de rotina laboratorial. Antibiogramas foram realizados, testando-se 15 antibióticos diferentes para definir o padräo de sensibilidade. Nos testes para os b-lactâmicos 96,1 por cento das cepas foram resistentes (R), nenhuma cepa se enquadrou na faixa intermediária (I) e 3,9 por cento mostraram sensibilidade (S) à penicilina; seus derivados semi-sintéticos foram oxacilina 87,0 R, 5,3 por cento I e 7,6 por cento S; ampicilina 99,2 R e 0,8 por cento S e nenhuma intermediária, amoxicilina 88,2 por cento R, 9,8 por cento I e 2,0 S; para os b-lactâmicos cefalotina 96 por cento S, 0,9 por cento R, 3,1 por cento I e cefoxitina 71,6 por cento S, 5,5 por cento R e 22,8 por cento I. Todas as cepas foram 100 por cento sensíveis à gentamicina, sulfazotrim e vancomicina. Nenhuma das cepas isoladas foi resistente à meticilina quando utilizada a concentraçäo padräo de 25mg/mL da droga para testes de cepas de origem humana (clone brasileiro MRSA III::B:A).

Efeito da infecção por Actinobacillus pleuropneumoniae nos mecanismos da coagulação do sangue de leitões / Effect of Actinobacillus pleuropneumoniae infection on pigs' blood coagulation system

O presente trabalho apresenta os resultados do estudo do efeito da infecção causada por Actínobacíllus pleuropneumoníae no sistema da coagulação do sangue de leitões. Vinte e cinco leitões desmamados, isentos de organismos patogênicos específicos, foram separados, ao acaso, em dois grupos. Dez leitões foram infectados com 5x1 06 CFU de A. pleuropneumoníae sorotipo 1, e quinze foram usados como controle negativo. O tempo parcial ativado de tromboplastina aumentou enquanto que o tempo da protrombina, expressado em porcentagem, diminuiu. As alterações observadas no tempo de trombina e na quantidade de fibrinogênio estão relacionadas com a formação de fibrina no processo de coagulação. Admitimos que estas observações estejam ligadas ao consumo de fatores de coagulação do sangue nos caminhos intrínsecos, extrínsecos e comuns. Assim, a hemorragia pulmonar e a formação de coágulos, que são características da fase aguda dessa doença, podem ser explicadas.

The effect of Actinobacillus pleuropneumoniae infection on pigs' blood coagulation system was studied. Twenty five specific pathogen free weaned piglets were randomly assorted into two groups. Ten of the piglets were infected with 5x10 6 CFU of A. pleuropneumoniaeserotype 1, and 15 used as negative contrais. The prothrombin time, expressed as percentage, decreased. The activated partial thromboplastin time increased and the thrombin time decreased. Concentrations of fibrinogen increased during the trial. These observations were consistent with consumptions of blood coagulation factors in the intrinsic, extrinsic, and common pathways of blood coagulation, producing coagulability. Therefore intrapulmonary haemorrhage and clot formation may be observed in the lungs of piglets infected with A. pleuropneumoniae.